LAPORAN KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS DAN KOLOM

LAPORAN PRAKTIKUM

KIMIA ORGANIK I

DISUSUN OLEH :

SANAQ ELFIRA PUTRI

(A1C117071)

           

NAMA DOSEN PENGAMPU :

Dr. Drs. SYAMSURIZAL, M.Si.

PROGRAM STUDI PENDIDIKAN KIMIA

JURUSAN MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

FAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENDIDIKAN

UNIVERSITAS JAMBI

2019

I.                    Data Pengamatan

7.1  Kromatografi Lapis Tipis

Perlakuan	Hasil Pengamatan
Disiapkan plat TLC
Sampel yang akan diuji diekstraki dengan metanol: a.    Buah naga b.    Bayam c.    Nanas d.   Kembang kertas e.    Semangka f.     Wortel g.    Pepaya h.    Kentang i.      Tomat j.      Kembang sepatu	Hasil dari ekstraksi sampel dengan metanol yaitu: a.    Larutan berwarna merah keunguan b.    Larutan berwarna hijau c.    Larutan berwarna kuning d.   Larutan berwarna merah pudar e.    Larutan berwarna merah jernih f.     Larutan berwarna oren g.    Larutan berwarna oren h.    Larutan berwarna coklat pudar i.      Larutan berwarna oren pudar j.      Larutan berwarna merah
Sampel yang telah diekstraksi ditotolkan ke plat TLC kemudian plat dimasukkan kedalam chamber yang berisi eluen (n-heksana : etil asetat = 2 ml : 1 ml). Diukur noda yang bergerak a.    Buah naga b.    Bayam c.    Nanas d.   Kembang kertas e.    Semangka f.     Wortel g.    Pepaya h.    Kentang i.      Tomat j.      Kembang sepatu	a.    Noda bergerak dengan jarak noda 3,9 cm dan jarak pelarut 4,8 cm b.    Jarak noda 0,3 cm dan jarak pelarut 4,8 cm c.    Jarak noda 3,8 cm dan jarak pelarut 4,8 cm d.   Jarak noda 2,5 cm dan jarak pelarut 4,8 cm e.    Jarak noda 3,7 cm dan jarak pelarut 4,5 cm f.     Jarak noda 3,9 cm dan jarak pelarut 4,5 cm g.    Jarak noda 3,8 cm dan jarak pelarut 4,5 cm h.    Jarak noda 0 cm dan jarak pelarut 4,5 cm i.      Jarak noda 4,1 cm dan jarak pelarut 4,7 cm j.      Jarak noda 4 cm dan jarak pelarut 4,7 cm

7.2 Kromatografi Kolom

Perlakuan	Hasil Pengamatan
Disiapkan kolom kromatografi dengan sebuah pipet tetes lalu disumbat ujung bawahnya dengan kapas dan dialiri dengan n-heksana	Kolom menjadi bersih dan ketika dialiri dengan n-heksan larutannya turun dan sisa kapas yang menempel di dinding kolom menjadi turun.
Dibuat silika gel dengan mencampurkan n-heksana dengan silika gel	Larutan menjadi bercampur
Dimasukkan kedalam kolom silika gel yang telah dibuat, sambil kolom diketuk-ketuk sampai setengah kolom.	Silik gel menjadi memadat dan n-heksannya turun ke bawah melewati kapas.
Sample disiapkan dan diekstrak dengan metanol.      a.       Buah naga      b.      Bayam      c.       Nanas      d.      Kembang kertas         e.       Semangka      f.       Wortel      g.      Pepaya      h.      Kentang      i.        Tomat      j.        Kembang sepatu	Didapatkan hasil yaitu:      a.       Larutan berwarna merah keunguan      b.      Larutan berwarna hijau      c.       Larutan berwarna kuning      d.      Larutan berwarna merah pudar      e.       Larutan berwarna merah jernih      f.       Larutan berwarna orange      g.      Larutan berwarna orang      h.      Larutan berwarna hitam      i.        Larutan berwarna orange pudar      j.        Larutan berwarna merah
Sampel di campur dengan sesudip bubuk silika gel, diaduk sampai kering	sampel menjadi menyatu dengan bubuk silikka gel dan warnanya sama dengan warna sampel.
Dimasukkan sampel yang sudah dicampurkan silika gel setinggi 1 cm kedalam kolom yang sudah ada silika gel lalu dialiri dengan eluennya. Sampel : a.       Buah naga b.    Bayam c.    Nanas d.   Kembang kertas e.    Semangka f.     Wortel g.    Pepaya h.    Kentang i.      Tomat j.      Kembang sepatu	Sampelnya di atas dan warnanya akan turun kebawah setelah dialiri dengan eluen. Hasil dari beberapa sampel :      a.       Sampel a dengan eluen yang dipakai n-heksana dan etil asetat (8:1) didapatkan fraksi sebanyak 4  botol.      b.      Sampel b dengan eluen yang dipakai n-heksana dan etil asetat (5:10) didapatkan fraksi sebanyak 5  botol.      c.       Sampel c dengan eluen yang dipakai kloroform dan metanol asetat (3:1) didapatkan fraksi sebanyak 3  botol.      d.      Sampel d dengan eluen yang dipakai kloroform didapatkan fraksi sebanyak 5  botol.      e.       Sampel e dengan eluen yang dipakai n-heksana dan etil asetat (3:2) didapatkan fraksi sebanyak 3  botol.      f.       Sampel f dengan eluen yang dipakai n-heksana dan etil asetat (3:2) didapatkan fraksi sebanyak 3  botol.      g.      Sampel g dengan eluen yang dipakai n-heksana dan etil asetat (3:2) didapatkan fraksi sebanyak 3  botol.      h.      Sampel h dengan eluen yang dipakai kloroform dan metanol (3:1) didapatkan fraksi sebanyak 4  botol.      i.        Sampel i dengan eluen yang dipakai n-heksana dan etil asetat (3:2) didapatkan fraksi sebanyak 3  botol.      j.        Sampel j dengan eluen yang dipakai n-heksana dan etil asetat (3:2) didapatkan fraksi sebanyak 3  botol.
Didiamkan fraksi yang ditutup dengan almuniumfoil yang diberi lubang beebrapa hari	fraksi yang ada dalam botol menguap
Botol yang berisi fraksi tadi ditetesi dengan setetes metanol, lalu di TLC	Akan didapatkan

7.3 TLC

Perlakuan

Hasil Pengamatan

Sampel ditotolkan pada plat TLC terdapat 5 totolan, yaitu Totolan 1 : Crude Totolan 2 : 2 Totolan 3 : 3 Totolan 4 : 4 Kemudian ditotolah sampel yang ada, yaitu: a.    Buah naga b.    Bayam c.    Nanas d.   Kembang kertas e.    Semangka f.     Wortel g.    Pepaya h.    Kentang i.      Tomat j.      Kembang sepatu

a.       Pada sampel a didapatkan hasil setelah di TLC yaitu yang bergerak hanya crudenya saja      b.      Pada sampel a didapatkan hasil setelah di TLC yaitu tidak ada yang bergerak pada plat tersebut      c.       Pada sampel a didapatkan hasil setelah di TLC yaitu tidak bergerak dan tidak berwarna      d.      Pada sampel a didapatkan hasil setelah di TLC yaitu crudenya bergerak dan ada titik ditengah jalannya crude yang berwarna ungu      e.       Pada sampel a didapatkan hasil setelah di TLC yaitu crudenya bergerak dan berwarna kuning      f.       Pada sampel a didapatkan hasil setelah di TLC yaitu crudenya  bergerak dan berwarna kuning. No.1 tidak bergerak tetapi berwara cream, no.2 dan seterusnya tidak terjadi apa-apa      g.      Pada sampel a didapatkan hasil setelah di TLC yaitu crudenya bergerak berwarna orange pudar, no.2 tidak bergerak tapi terdapat warna cream pudar, no.3 bergerak berwarna cream pudar, no.4 tidak bergerak tapi terdapat warna cream pudar       h.       Pada sampel a didapatkan hasil setelah di TLC yaitu crudenya tidak bergerak tetapi terdapat wara abu-abu      i.        Pada sampel a didapatkan hasil setelah di TLC yaitu no.3 bergerak dan berwarna abu-abu      j.        Pada sampel a didapatkan hasil setelah di TLC yaitu crudenya tidak bergerak tetapi terdapat warna cream

II.                Pembahasan

Pada percobaan ini dilakukan percobaan mngenai kromatografi lapis tipis dan kolom. Kromatografi ialah suatu teknik analisa didalam kimia organik dan biasa digunakan dalam memisahkan campuran suatu zat kemudian dianalisis secara menyeluruh. Ada berbagai jenis kromatografi, yaitu kromatografi cair, gas, penukar ion, afinitas, yang mana tenik tersebut menggunakan prinsip yang sama. Terdapat beberapa istilah penting dalam kromatografi seperti : fase gerak, fase diam, eluen, eluat, elusi dan analit. Fase gerak adalah suatu pelarut yang mengalir didalam kromatografi kolom atau lapis tipis. Fase diam adalah suatu zat padat yang melekat pada lapisan kertas yang biasanya berupa silika gel, selulosa, dll tergantung jenis kromatografinya (http://syamsurizal.staff.unja.ac.id/2019/04/10/325teknik-pemisahan-dengan-khromatografi/).

a.       Kromatografi Lapis Tipis

Pertama-tama sebelum kami melakukan kromatografi lapis tipis, kami menyiapkan bahan dan alat yang akan digunakan. Bahan yang diperlukan seperti sampel yang akan digunakan. Sampel yang akan digunakan ada 10 yaitu : a. Buah naga, b. Bayam, c. Nanas, d. Bunga kertas, e. Semangka, f. Wortel, g. pepaya, h. Kentang, i. Tomat, j. Bunga sepatu. Pada kromatografi ini melibatkan fasa gerak dan fasa diam yang mana fasa geraknya adalah eluen yang berupa cairan sedangkan fasa geraknya adalah plat TLC.

Ketika akan melakukan kromatografi lapis tipis awalnya dipotong plat dengan panjang 5cm dan lebarnya 3cm. Kemudian diberi batas 0.5cm. dan fasa diam yang digunakan atau eluen yang digunakan adalah n-heksane dan etil asetat dengan perbandingan 2:1. Setiap sampel ditetesi pada plat. Satu plat terdiri dari 4 totolan yang terdiri dari 4 sampel yang berbeda. Plat pertam terdiri dari buah naga, bayam, nanas, bunga kertas dan kami totolkan ke plat menggunakan pipa kapiler. Setelah itu plat yang pertama dimasukkan kedalam chamber yang telah berisi eluen dan ditunggu sampai eluen bergerak hingga garis batas atas. Ketika eluen telah bergerak hingga garis batas atas pada plat dan dikeluarkan plat tersebut. dilihat noda yang ada plat tersebut agar lebih jelas maka digunakan sinar UV. Maka didapatkanlah jarak yang ditempuh oleh senyawa dan jarak yang ditempuh oleh pelarut. Hal diatas dilakukan juga untuk semangka, wortel, pepaya, kentang, tomat dan bunga sepatu. Masing-masing sampel tersebut ditotolkan di plat TLC dan di masukkan kedalm chamber. Setelah beberapa menit dan eluen telah bergerak naik sampai garis batas atas maka plat tersebut dikeluarkan dalam chamber. Didapatkan jarak tempuh senyawa tersebut dan jarak yang ditempuh oleh eluen. Kemudian dihitung nilai Rfnya dengan menggunakan rumus :

Rf = jarak yang ditempuh oleh senyawa / jarak yang ditempuh oleh eluen

Setelah percobaan didapatkan Rf setiap sampel yaitu :

Untuk sampel A          Rf = 3,9 / 4,8 = 0,8215

Untuk sampel B          Rf = 0,3 / 4,8 = 0,79166

Untuk sampel C          Rf = 3,8 / 4,8 = 0,520

Untuk sampel D          Rf = 3,7 / 4,5 = 0,8222

Untuk sampel F           Rf = 3,9 / 4,5 = 0,8666

Untuk sampel G          Rf = 3,8 / 4,5 = 0,8444

Untuk sampel H          Rf = 0 / 4,5 = 0

Untuk sampel I           Rf = 4,1 / 4,7 = 0,8723

Untuk sampel J           Rf = 4 / 4,7 = 0,8510

b.      Kromatografi Kolom

Pada kromatografi kolom, yang pertama kali dilakukan adalah penyiapan kolom. Kemudian dimasukkan kapas kedalam kolom tersebut. setelah itu ditetesi dengan n-heksane di sekeliling kolom tersebut. Hal ini dilakukan agar kolom menjadi steril dan juga untuk membersigkan kolom tersebut. kemudia dilarutkan silika gel dengan n-heksan dan dimasukkan kekolom hingga setengah kolom dan hingga silika gel memadat agar silika gel memadat maka kami harus mengetuk-ngetuk dinding kolom. Dimasukkan satu sudip silika gel dan ditetesi sampel di cawan petri. Setelah bercampur, campuran tersebut dimasukkan kedalam kolom. Dan disiapkan juga botol kecil.

Pada sampel a dengan eluen yang dipakai n-heksana dan etil asetat 8:1 didapatkan fraksi sebanyak 4  botol. Pada saat cairan turun, sampel tidak ikut turun. Kemudian diganti perbandingannya dengan 16:2. Ternyata sampel turun sedikit dan dimasukkan lagi pelarutnya turun hampir setengah. Sampel b dengan eluen yang dipakai n-heksana dan etil asetat (5:10) didapatkan fraksi sebanyak 5  botol. Pada botol 1 warnanya bening, botol 2 hijau, botol 3 hijau pudar, botol 4 bening, botol 5 bening. Sampel c dengan eluen yang dipakai kloroform dan metanol asetat (3:1) didapatkan fraksi sebanyak 3  botol. Pada botol 1 warnanya bening, botol 2 bening dan botol 3 bening. Sampel d dengan eluen yang dipakai kloroform didapatkan fraksi sebanyak 5  botol. Pada botol 1 berwarna bening, botol 2 bening ada minyak, botol 3 agak keruh, botol 4 bening, botol 5 bening. Sampel e dengan eluen yang dipakai n-heksana dan etil asetat (3:2) didapatkan fraksi sebanyak 3  botol. Botol 1 warnanya bening dan sampelnya turun, botol 2 kuning pudar dan botol 3 bening. Sampel f dengan eluen yang dipakai n-heksana dan etil asetat (3:2) didapatkan fraksi sebanyak 3  botol. Botol 1 bening, botol 2 kuning cerah dan botol 3 bening. Sampel g dengan eluen yang dipakai n-heksana dan etil asetat (3:2) didapatkan fraksi sebanyak 3  botol. Botol 1 warnanya bening, botol 2 kekuningan, botol 3 bening dan botol 4 bening. Sampel h dengan eluen yang dipakai kloroform dan metanol (3:1) didapatkan fraksi sebanyak 4  botol. Botol 1 bening, botol 2 kekuningan, botol 3 bening dan botol 4 bening. Sampel i dengan eluen yang dipakai n-heksana dan etil asetat (3:2) didapatkan fraksi sebanyak 3  botol. Botol 1 bening, botol 2 kuning keruh, botol 3 dan 4 bening. Sampel j dengan eluen yang dipakai n-heksana dan etil asetat (3:2) didapatkan fraksi sebanyak 3  botol. Botol 1 bening, botol 2 kemerahan dan botol 3 bening. Ketika melakukan kromatografi kolom sampel yang akan dianalisis turun nya dengan kecepatan yang berbeda-beda dan setelah turun ditampung ke dalam tabung kecil. Dan hasil dari kromatografi tersebut di simpan dalam botol kecil dan didiamkan hingga kurang lebih seminggu.

c.       TLC

Pada sampel a tiap botol ditambahkan metanol. Kemudia baru ditotoli di plat TLC dan didapatkan hasil yang bergerak hanya crudenya saja. Sampel b ditetesi metanol tiap botol. Tidak ada yang bergerak tetapi hanya memberikan warna pada totolan ke 1,2,3. Pada sampel c digunakan kloroform dan metanol dengan perbandingan 2:1. Hasilnya tidak bergerak dan tidak berwarna. Sampel d, tiap botolnya di tetesi dengan metanol dan hasilnya yang bergerak hanya crudenya dan di tengah ada titik berwarna ungu. Sampel e ketika di TLC menghasilkan crudenya bergerak dan berwarna kuning. Pada sampel f crudenya bergerak dan berwarna kuning, no,1 tidak bergerak dan berwarna cream, no,2 tidak ada apa-apa, no. 3 bening.  Sampel g crudenya bergerak dan warnanya orange pudar, no.2 tidak bergerak tetapi terdapat warna cream pudar, no.3 bergerak dan berwarna cream pudar, no.4 tidak bergerak tetapi terdapat warna cream pudar. Sampel h crudenya tidak bergerak tetapi terdapat warna abu-abu. Sampel i botol 3 bergerak dan berwarna abu-abu. Sampel j crudenya tidak bergerak dan berwarna cream.

III.             Permasalahan

1.      Mengapa kolom sebelum digunakan harus ditetesi dengan n-heksan?

2.      Mengapa pada kromatografi kolom kecepatan sampel untuk turun berbeda-beda?

3.      Bagaimana cara agar silika gel dalam kolom memadat?

IV.             Kesimpulan

1.      Prinsip dasar dari kromatografi yaitu memisahkan suatu zat berdasarkan atas distribusi sampel diantara 2 fasa yaitu fasa gerak dan fasa diam

2.      Kromatografi lapis tipis (KLT) sangat bergantung pada cepat lambat suatu noda dengan lapis tipis

3.      Metanol memiliki kepolaran yang lebih besar ketimbang kloroform

V.                Daftar Pustaka

·         Tim Penuntun Kimia Organik I.2019. Penuntun Kimia Organik I. Jambi:Universitas Jambi.

·         http://syamsurizal.staff.unja.ac.id/2019/04/10/325teknik-pemisahan-dengan-khromatografi/ diakses tanggal 16 April 2019

·         Day& Underwood. 1987. Analisis Kimia Kualitatif. Jakarta:Erlangga.

·         Sasikumar. 2012. Extraction Preliminary Phytochemical Screening of Active Compounds In Morinda Citrifolia Fruit. Asian J Pharm Clin Res, 5:179-181.

·         Khopkar. 1990. Konsep Dasar Kimia Analitik. Jakarta : Universitas Indonesia Press.

VI.             Lampiran

Hasil TLC

Penyinaran dengan Sinar UV

Persiapan Sampel

Proses Kromatografi Kolom